96 孔细胞球蜂巢培养板说明书

苏州三体生物科技有限公司　研发部

【产品名称】96 孔细胞球蜂巢培养板

【产品货号】AUT042804

【包装规格】1 个/包，5 包/箱

【产品用途】

本产品专为无菌环境下的三维细胞球培养设计，采用超低吸附表面处理并配合多个 U 型底凹面结构，可促使细胞自发聚集成多个球。本产品适用于各类可成球细胞，适用范围广；使用该培养板，可高效、高通量地进行细胞球培养与分析。

使用 96 孔细胞球蜂巢培养板制备细胞球后，能够直接在孔板内进行成像与高通量筛选实验，包括活细胞成像、化学品的毒性检测、药物的药效及毒性检测等。另外，也可收集细胞球用于开展定量聚合酶链式反应（qPCR）、蛋白免疫印迹（WB）、染色及组学等实验，进行分子与细胞生物学的相关机制研究，为生物医药领域的研发提供重要支撑。

【储存条件及有效期】室温、干燥、避光保存；货架有效期 1 年。

【产品性能指标】

1、透明 96 孔板，56 个凹面/孔，超低吸附表面处理。

2、板底透光率高，适合成像和荧光检测。

3、孔内左侧壁设有加样缓冲平台，有效防止移液带来的冲击干扰细胞球体。

4、孔板四周有四个防蒸发槽，实验时加入适量缓冲液，能够有效防止边缘效应；中间设置隔断，以保持四周液体分布稳定。

5、最大直径(单凹坑):0.75 mm；细胞成球直径(单凹坑):0.5 mm 以内。

6、不含 DNA 酶/RNA 酶，无热原，无内毒素；辐照灭菌。

7、通过化学表征检测（参照 ISO 10993-18:2020 & ISO 10993-12:2021）。

【使用方式】

1、将 96 孔细胞球蜂巢培养板（以下简称 96 孔蜂巢板）外包装 75%酒精消毒后，迅速置于超净台中，撕开外包装取出蜂巢板。

2、每孔加入 100 μL 实验要求对应的预热的培养基，盖上板盖。放入细胞培养箱中保持 15 min 以上，充分润湿孔内凹坑面。

3、从培养箱中取出 96 孔蜂巢板，放入超净台中，观察凹坑面是否全部浸润。若全部浸润可直接进行下一步操作；若有少量未浸润的凹坑面，用移液枪对准气泡处轻轻吹打，使所有的凹坑面完全浸润。

4、每孔吸出 50 μL 预浸润培养基丢弃，加入 50 μL 实验要求的细胞悬液。用移液枪吹打 2-3 次混匀，保证每个坑内细胞均一。注：细胞球直径与加入的细胞数量及大小有关。加入的最佳细胞数量可从 2×10⁴/孔开始摸索条件，此数量不是细胞浓度，最佳细胞数量的肿瘤细胞系细胞，可在每个凹坑中形成直径约 150 μm 左右的细胞球。

5、在每个防蒸发槽中加入 1 mLPBS 缓冲液或者无菌水，盖上板盖，做好标记，放入培养箱进行培养。注：肿瘤细胞成球时间通常 1-3 天，原代细胞成球时间 3-5 天。

6、细胞聚集后，用枪抵住缓冲平台，缓慢加入 100μL 新鲜培养基，定容至每孔 200μL。

7、细胞成球后，每隔 48h 进行半换液，为细胞提供营养并移除代谢物。换液时，将枪头抵在缓冲平台上进行吸液和加液，防止直接换液的冲击力干扰球体。注：若所培养细胞球直径较大/细胞数量较多，可酌情缩短换液时间间隔。

8、原位操作：对细胞球进行相应处理后，可直接在板内进行显微成像和荧光检测。此方法适用于高通量细胞活性测试、药物药效与毒性评估、代谢与生化指标测试等生物学实验。

9、转移操作：用培养基对细胞球轻轻吹打悬浮，吸取细胞球悬浮液收集球体。后续可用于体内进行疾病模型的建立与治疗效果评估；收集的上清液可进一步纯化，用于医学美容领域的研究。注：用 1mL 的移液器进行细胞球的收集，需要剪去吸头前端 0.5cm，保证吸头不会破坏细胞球的完整性。

【产品外观】

【适用范围】

可贴壁细胞皆可成球。以下是经过验证可成球的细胞系：

【注意事项】

1、不可冷藏或冷冻保存。

2、96 孔蜂巢培养板孔内凹面尽量避免刮蹭。

3、产品为一次性使用耗材，请勿重复使用。

4、使用过程中注意无菌操作，避免污染。

5、请在一年货架有效期内使用。

【说明书核准及修改日期】20260416

网址：www.vivoid.cn
地址：苏州市吴中区龚塘路 888 号 13 栋
20260416