细胞球蜂窝培养片-B 款说明书

苏州三体生物科技有限公司　研发部

【产品名称】细胞球蜂窝培养片-B 款

【产品货号】AUT042805

【包装规格】12 个/盒，5 盒/箱

【产品用途】

本产品用于在无菌环境中培养细胞球，其表面具有超低吸附特性，可促使细胞自发成球。本产品适用于各类可贴壁细胞，适用范围广，使用该培养板，可高效地进行细胞球培养。

培养出的细胞球具有广泛用途，包括化学品的毒性检测、药物的药效及毒性检测。另外，在对细胞球进行处理并收集细胞球后，可开展定量聚合酶链式反应（qPCR）、蛋白免疫印迹（WB）、染色及组学等实验，以进行分子细胞生物学的相关机制研究，也为生物医药领域的研发提供重要支持。同时，细胞球还可作为潜在的输入/植入方案，用于缓解和治疗疾病。

【储存条件及有效期】室温、干燥、避光保存；货架有效期 1 年。

【产品性能指标】

1、透明片状，片整体直径 15.4 mm，60 个凹面。

2、中心凸起的提手部分方便夹取，边缘裙边防止细胞脱落，六边的缓冲壁可防止细胞球在换液时被冲散。

3、最大直径(单孔):1.3 mm；细胞成球直径(单孔):1 mm 以内。

4、不含 DNA 酶/RNA 酶，无热原，无内毒素；辐照灭菌。

5、通过化学表征检测（参照 ISO 10993-18:2020 & ISO 10993-12:2021）。

【使用方式】

1、放置到孔板内：取适量细胞球蜂窝培养片（以下简称蜂窝片），用酒精消毒的镊子捏住蜂窝片的提手处，正面向上放置于 24 孔板中。

2、蜂窝片预湿润：在蜂窝片上方加入 1 mL 实验要求对应的培养基，盖上板盖。放入细胞培养箱中保持 15 min。注：培养基最少加入 0.5 mL/孔，过少则不便于后续的吹打；培养基应加在蜂窝片的上方，不要贴着孔壁加入。此步骤是为了使培养液更好的润入坑内。

3、去除气泡残留：从培养箱中取出 24 孔板，放入超净台中，用 1 mL 移液枪将蜂窝片压至孔板底部，排去培养片与孔板间的气泡；随后，观察蜂窝片凹坑中是否有气泡未排出，若有少量气泡，用移液枪轻吹以除去凹坑内的气泡。注：可在孔板底部放置深色卡片/纸张，以便观察蜂窝片孔中的气泡去除情况。另外，在吹打过程中，尽量不要产生气泡，避免干扰观察。

4、加入细胞悬液：在上述孔中，每孔吸出 500 μL 培养基丢弃。加入实验要求的细胞悬液，每孔 500 μL。用移液枪吹打 2-3 次混匀（一定要混合均匀保证每个坑内细胞均一）。注：细胞球直径与加入的细胞数量及大小有关。加入的具体细胞数量可从 10×10⁴/孔开始摸索条件，此数量对于肿瘤细胞系，每个坑内可形成一个直径约 600-800 μm 的细胞球。

5、细胞球的培养：盖上板盖，做好标记，放入培养箱进行培养。注：肿瘤细胞成球时间通常 1-3 天，原代细胞成球时间 3-5 天。

6、细胞球的换液：细胞成球后，每隔两天需进行半换液，为细胞提供营养并移除代谢物。注：换液时可将枪头轻轻抵在孔壁与缓冲壁之间进行吸液和加液，防止直接加液时将细胞球从孔内冲出。

7、细胞球的收集：用培养基对细胞球轻轻吹打悬浮，吸取细胞球悬浮液即可收集。或可将蜂窝片从提手处提起，倒置放入加有磷酸缓冲盐溶液（PBS）的培养皿中，轻敲蜂窝片，使细胞球掉落至 PBS 中，移除蜂窝片即可。

8、收集的细胞球可以进行后续药物筛选、化妆品安全性评估，或在体内进行疾病模型的建立与治疗效果评估；收集的上清液可进一步纯化，用于医学美容领域的研究。

【产品外观】

【适用范围】

可贴壁细胞皆可成球。以下是经过验证，可成球的细胞系：

【注意事项】

1、不可冷藏或冷冻保存。

2、细胞球蜂窝培养片表面尽量避免剐蹭。

3、产品为一次性使用耗材，请勿重复使用。

4、使用过程中注意无菌操作，避免污染。

5、请在一年货架有效期内使用。

【说明书核准及修改日期】20251010

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地址：苏州市桑田岛科创园 2 号楼 5 楼
20251215